Real-Time qRT-PCR经过对经典PCR扩增反响中每一个循环产品荧光信号的及时检测,银河可以完成对实在模板的定量剖析。经过准确设定引物(primer)和探针(probe),qRT-PCR技能可以很大范畴内定量的检测目的转录本的拷贝数,也即表达程度。因而长被作为转录组剖析中的金尺度(Gold Standard).qRT-PCR只能测定一个转录本的表达程度,同时也必要晓得待检测转录本的序列,难以用来发明未知的转录本。
Microarray在高通量测序之前是次要的高通量转录本表达剖析技能。微阵列(microarray),也称基因芯片(gene chip),经过将几十万个不等的探针(probe)分子牢固在约1cm见方的固体片基上制成的。使用核苷酸分子在构成双链时碱基互补配对原理,microarray可以一次性检测出样本中一切与探针互补的核苷酸片断,从而疾速失掉样本中基因的表达谱(expression profile),因而,microarray从上世纪90年月问世以来,在生物,医学,农学等范畴疾速取得了普遍使用。与qRT-PCR相比,micoarray固然在通量上有了明显的进步,但仍旧必要完成确定待测转录本的序列。
EST(表达序列标签)技能经过对一个随机选择的cDNA克农举行单次测序来取得cDNA的局部序列。与microarray差别,EST是基于测序的,并不必要事前晓得待检测转录本的序列。可以被用来发明新的转录本。早在1991年,事先还在NIH的Craig Venter等就开端使用EST来寻觅人类的新基因。但是,由于事先测序技能通量的限定,一次EST通常只能失掉几千个转录本的序列,远远无法举行全转录本程度的profiling.
与传统的Real-Time qRT-PCR、基因芯片(gene chip)和EST(表达序列标签)技能相比,RNA-seq深度测序技能使得研讨职员初次可以,在全转录组程度使用测序技能同时举行定量与定性的剖析,次要包罗以下几个方面:
1. 取得物种大概构造的信息;
2. 失掉转录本上基因的相干信息,如:,功效等;
3. 发明新的基因;
4. 基因布局优化;
5. 发明;
6. 发明;
7. 差别剖析。
以后广州银河生物科技有限公司在转录组学所触及的产品次要有mRNA测序剖析、smallRNA测序剖析、cirRNA测序剖析、LncRNA测序剖析及多组学团结剖析。